A citometria de fl uxo tem como principal característica metodológica a análise:

São aplicações clínicas da citometria de fl uxo o diagnóstico:

Paciente de 70 anos, hemoglobina 14 g/dL, leucócitos 65.000/mm3, linfócitos 60%, segmentados 35%, monócitos 5%, plaquetas 250.000/mm3. Na análise do sangue periférico por citometria de fl uxo foram identificadas 59,0% de células linfoides B de aspecto maduro e cromatina condensada em blocos, com a seguinte marcação antigênica: CD5, CD19, CD20 fraca intensidade, CD23, CD43, CD45, CD79b fraca intensidade, monoclonalidade de cadeia leve Kappa. O diagnóstico mais provável é leucemia:

Na leucemia mieloide aguda é encontrada a seguinte expressão antigênica:

Paciente de 7 anos apresenta-se com febre, dor óssea, petéquias e equimoses em abdome e membros inferiores, Hb 8g/dL, leucócitos 25.000/mm³, segmentados 5%, monócitos 5%, células imaturas 85%, plaquetas 35.000/mm³. Na análise imunofenotípica apresentava expressão antigênica de CD10, CD19 forte intensidade, CD22, CD34, CD45 moderada intensidade, ausência de expressão de antígenos mieloides. De acordo com os dados clínicos e laboratoriais citados, o diagnóstico mais provável é leucemia:

Os antígenos CD3, CD19 e CD33 são expressos respectivamente nas células:

Sobre a pesquisa de doença residual mensurável (DRM) por citometria de fl uxo é correto afirmar que é útil como monitoramento de doença residual durante tratamento:

Dos antígenos abaixo relacionados, a leucemia linfoblástica aguda T cortical apresenta a seguinte expressão:

São antígenos relacionados à imaturidade celular e expressos comumente em células blásticas:

Dos perfis imunofenotípicos abaixo, o que corresponde à leucemia promielocítica aguda é:

A doença granulomatosa crônica (DGC) é um grupo de síndromes que compartilha um defeito em um componente do complexo NADPH oxidase dos fagócitos. O corante que pode ser utilizado, por citometria de fl uxo, para auxiliar no diagnóstico da DGC é:

Os movimentos dos leucócitos do espaço vascular para o sítio ativo da infecção envolvem diapedese, ou seja, a passagem dos neutrófilos que rolam e se aderem à superfície das células endoteliais. O marcador que está envolvido na adesão leucocitária é:

Os ensaios de proficiência possibilitam ao laboratório analisar a contribuição do erro sistemático para o processo, assim como seu erro total. O ensaio de proficiência proporciona:

A análise que pode ser realizada para se calcular a imprecisão de um resultado laboratorial é:

A esferocitose hereditária (EH) é uma anemia hemolítica congênita caracterizada pela presença de hemácias em forma de esfera. De acordo com as opções abaixo, o corante que pode ser utilizado, por citometria de fl uxo, para auxiliar no diagnóstico da EH é:

A Tromboastenia de Glanzmann é causada pela deficiência do complexo GPIIb-IIIa nas plaquetas. O paciente apresenta tempo de sangramento prolongado, mas com número e morfologia de plaquetas normais. Os marcadores que devem estar ausentes ou diminuídos nesta síndrome são:

A síndrome de Bernard-Soulier é caracterizada pela deficiência de GPIb nas plaquetas, presença de plaquetas gigantes e plaquetopenia. O marcador que deve estar ausente ou diminuído nessa síndrome é:

A apoptose faz parte da morte celular programada, que pode ser caracterizada como:

O tratamento de eleição em muitas neoplasias hematológicas malignas, imunodeficiência e erros inatos do metabolismo é o transplante de células tronco hematopoiéticas (TCTH). Dentro desse contexto, quando se fala de quantificação de CD34, a precisão é um dos critérios mais importante para a tomada de decisões clínicas. Para a quantificação de células CD34 a classe de anticorpo que deve ser, obrigatoriamente, utilizada é:

Equipamentos de laboratório desempenham um papel fundamental nos resultados de pesquisa e em laboratório de análises clínicas. Pode-se dizer que um equipamento possui exatidão quando fornece:

A citometria de fl uxo é uma metodologia capaz de mensurar simultaneamente múltiplos parâmetros de uma população de células ou partículas em suspensão. Os canais para detecção de tamanho e complexidade/granularidade interna das células em um citômetro de fl uxo são denominados, respectivamente:

Um tubo contendo células em suspensão é colocado no citômetro de fl uxo e a amostra é aspirada por uma força a vácuo até a câmara de fl uxo. Esta câmara tem a função de fazer com que a suspensão de células passe por uma lâmina de fl uxo contínuo e seja revestida por uma solução isotônica. Esta câmara é conhecida como:

Quando as partículas são interceptadas pelo feixe de laser, elas sofrem dispersão de acordo com as características morfológicas e estruturais das partículas. A luz que incide e sofre dispersão frontal é coletada por detector conhecido como:

A especificidade, seleção e captação adequada dos sinais luminosos são controladas por um conjunto de sistema óptico integrado e composto por filtros que podem ser permissivos ou não a certos comprimentos de onda da luz emitida. De acordo com o referido, a frase que melhor se aplica é:

Normalmente, os sinais de forward scatter e side scatter são captados por detectores específicos. Esses detectores seriam, respectivamente:

Geralmente, os fluorocromos estão conjugados a um anticorpo monoclonal que se liga ao seu epítopo específico na célula ou a qualquer outro composto biológico. Os anticorpos monoclonais podem se dividir em simples e compostos. Um exemplo de anticorpo monoclonal composto é:

Os tandem dyes são definidos como compostos por dois fluorocromos de comprimentos de ondas:

Os anticorpos monoclonais (AcMo) devem ser validados antes de serem liberados para uso em rotina. A validação contempla titular ou comparar o AcMo novo com um AcMo previamente testado para definir o melhor volume a ser utilizado. O lote e a data de recebimento dos produtos devem ser considerados na validação, sendo que: I. Anticorpos monoclonais do mesmo lote e recebidos no laboratório na mesma data: faz-se necessária a validação de apenas 1 anticorpo. II. Todos os anticorpos monoclonais com lotes diferentes devem ser testados, mesmo quando recebidos na mesma data. III. Todos os monoclonais, independente do lote, devem ser testados. IV. Anticorpos monoclonais do mesmo lote e recebidos no laboratório em datas diferentes: faz-se necessária a validação de apenas 1 anticorpo. Sobre as afirmativas acima, pode-se dizer que:

O stain index é a razão entre a separação da população:

A citometria de fl uxo multiparamétrica permite ao usuário a análise simultânea de dados. A diversidade de anticorpos proporcionou ao longo dos anos, de acordo com as opções abaixo:

A aplicação de protocolos multiparamétricos proporcionou a sobreposição espectral dos diferentes fluorocromos em um mesmo tubo. Devido a isso é necessário realizar, entre as opções abaixo, ajuste de:

Em relação à análise de consistência para as subpopulações linfocitárias, é CORRETO afirmar que:

A hemoglobinúria paroxística noturna (HPN) é uma expansão clonal causada por uma mutação somática do gene PIG-A que codifica para uma enzima crítica na formação de glicosil-fosfatidil-inositol (GPI). Dos marcadores citados abaixo, a proteína ancorada a GPI que é recomendada para definir melhor os clones HPN de hemácias do tipo I, II e III é:

O CD157 é uma molécula responsável por reconhecer dois tipos de linhagens celulares que são afetadas pela HPN. Das linhagens citadas abaixo, esta molécula reconhece:

O ciclo celular das células eucarióticas é dividido em três fases principais. Com base nisso, associe as colunas: Coluna I 1. Fase de Síntese 2. Marcador comumente utilizando para avaliar o ciclo celular por citometria de fl uxo 3. Fase G0/G1 4. Fase G2 5. Aneuploidia Coluna II ( ) Estágio de repouso celular e inicio do preparo para divisão celular. ( ) Marcada pelo início da duplicação genética. ( ) Célula que difere do número diploide normal pela presença ou ausência de um ou mais cormossomos. ( ) Iodeto de propideo. ( ) As células contêm conteúdo de DNA duplo, definido como 4n (tetraploide), e suficiente para duplicação por mitose. De cima para baixo, a sequência correta é:

Para a marcação do conteúdo de DNA, podem ser utilizados fluoroforos que se ligam ao DNA e emitem fluorescência, quando excitados pelo comprimento de onda correspondente. Entre estes pode-se citar:

Células em proliferação replicam as suas moléculas de DNA durante a fase S do ciclo celular. Por meio da citometria de fl uxo pode-se acompanhar as células que estão sintetizando DNA através da utilização de:

Durante a análise do ciclo celular, o iodeto de propídio também pode se ligar ao RNA, causando diversas interferências. Para evitar interferências, o seguinte reagente pode ser utilizado:

Em relação ao controle de qualidade em citometria de fl uxo, é CORRETO afirmar que:

As células T regulatórias (Tregs) representam 5 a 10% dos linfócitos T CD4+ do sangue periférico e constituem uma subpopulação de células T, essencial para a regulação da resposta imune a antígenos próprios e estranhos. De acordo com as opções abaixo, o fator de transcrição que é fundamental para o desenvolvimento, sobrevivência e função efetora dessas células é: