A microscopia ótica confocal tem como princípio básico, para selecionar os planos focais que contribuirão para a formação da imagem e eliminar contribuições de planos indesejados, os seguintes componentes:

Qual a menor separação lateral entre dois objetos que podem ser distinguidos em microscopia confocal?

Sobre as lentes objetivas usadas em microscopia ótica confocal, assinale o item correto.

Um técnico de microscopia confocal, ao analisa ruma amostra, observou o fenômeno de photobleaching em suas medidas. O que pode ter causado isso?

Com relação à resolução axial, assinale a opção correta.

Um técnico em microscopia ótica confocal, utilizando um laser de excitação λ = 632,8 nm, deseja realizar imagens em uma área de 30x30 μm de nano partículas fluorescentes que têm 1 nm de diâmetro. Tais nano partículas marcadoras não estão aglomeradas e encontram-se espalhadas sobre uma lamínula de baixo sinal ótico. Qual seria a menor quantidade de pixels (largura x altura) da imagem de modo a não perder o sinal ótico de nenhuma nano partícula durante o experimento?

Assinale o item incorreto a respeito do apropriado manuseio e limpeza de componentes óticos.

Um técnico de um laboratório de microscopia ótica confocal observou que sua lente objetiva encontra-se suja. Qual procedimento abaixo é correto a respeito da limpeza da lente?

Com relação à instalação elétrica segura do equipamento de microscopia confocal, marque a opção correta.

Com o intuito de prevenir problemas operacionais, defeitos e garantir vida longa ao equipamento de microscopia confocal, assinale o item certo.

Ao se analisar imagens tridimensionais, deve-se estar atento ao diâmetro do orifício (pinhole). Qual o efeito da diminuição do diâmetro do orifício para a obtenção de imagens 3D?

Marque o item correto a respeito de colocalização.

Qual fenômeno ótico é responsável pela origem do limite de resolução lateral?

Ao analisar uma imagem obtida em um microscópio confocal, um usuário percebe que seu pixel está ovalado. O que pode ter causado isso?

Um usuário de microscopia confocal gostaria de visualizar e guardar os espectros completos de fotoluminescência de uma certa região da sua amostra. Para isso, ele precisa fazer a seguinte modificação na configuração do microscópio:

Marque a opção incorreta a respeito do arquivo de produtos químicos.

A respeito do descarte de produtos químicos, analise-as afirmações abaixo e assinale a opção correta.

Qual opção a seguir é a mais apropriada para uma limpeza típica de lâminas de microscopia de vidro?

Para um uso eficiente de um microscópio confocal, o operador do equipamento precisa compreender corretamente os espectros de excitação e de emissão dos fluoróforos usualmente empregados. Assinale o item correto.

Ao analisar uma amostra de tecido corado com DAPI e Alexa 488 que foram analisadas por microscopia confocal, foi detectada uma sobreposição de espectro de emissão e uma imagem com muito brilho também foi gerada no plano focal. Assinale a opção que apresenta uma possível correção desses dois fatores.

No caso de compostos alcali, qual o tipo de material que deve se evitar para o armazenamento seguro desses compostos:

O decaimento da fluorescência observado nos fluoróforos é motivo de preocupação para os pesquisadores que utilizam tais moléculas e também para os seus fabricantes. Ao se deparar com uma amostra suscetível a photobleaching quais são os parâmetros que o técnico pode alterar na análise da amostra no intuito de minimizar o photobleaching.

Para a formação de uma imagem optimal nomicroscópio confocal, o que ocorre, respectivamente, na seção ótica, na resolução horizontal e no contraste da imagem quando se aumenta o diâmetro do pinhole posicionado antes do fotomultiplicador em um microscópio ótico confocal?

Para a preparação de amostras para microscopia confocal, alguns protocolos utilizam rotineiramente algum fluoróforo, como a fluoresceína, ligada a um anticorpo secundário para reconhecer especificamente uma proteína. Esse tipo de técnica permite a localização precisa de uma determinada proteína dentro da célula. O pesquisador pede ajuda ao tecnólogo para realizar a técnica em que ele consiga marcar duas proteínas diferentes na mesma célula e localizar suas posições. Qual a técnica a ser utilizada nesse caso?

Sempre que possível, dependendo da natureza do composto químico, os resíduos podem ser tratados no laboratório e descartados na rede de esgoto. No caso de ácidos e bases qual o procedimento de descarte?

A proteína fluorescente verde (YFP) tem sido largamente utilizada em laboratórios de pesquisa científica e seu espectro de emissão de luz está em torno de 527nm. Considerando que um pesquisador precisa analisar uma amostra de tecido marcada com GFP, o tecnólogo precisa escolher os filtros de excitação e emissão irá aconselhá-lo da seguinte maneira, sendo (1) o primeiro filtro, (2) o espelho dicroico e (3) o segundo filtro, respectivamente:

A técnica de Imunofluorescência envolve a ligação antígeno-anticorpo e pode ser visualizada no microscópio confocal. Esta técnica se fundamenta na utilização de anticorpos ou antígenos conjugados a marcadores (por exemplo: fluorocromos), quando excitados por uma fonte de luz (laser), emitem luz no espectro visível. Sobre esta técnica é correto afirmar:

Com relação à limpeza após derramamento de substâncias comumente usadas em laboratórios esta pode ser feita de que maneira e quais os tipos de limpeza possíveis que podem ser executadas de acordo com a natureza do material derramado?

Solventes orgânicos são separados em duas classes, os clorados e não clorados. Qual o tipo de descarte mais adequado para essa classe de solventes?

FISH é uma técnica de immunohistoquímica específica. Acerca das suas aplicações, assinale a opção correta.

Quanto à limpeza da parte ótica do microscópio é recomendável:

Material usado em cultura celular, precisa passar por um processo de limpeza minucioso para evitar contaminação. Qual a sequência correta na limpeza de material para cultura celular?

Quanto à limpeza de vidraria comum recomenda-se a seguinte sequência de lavagem.

Uma limpeza mais rigorosa requer o uso de solução sulfocrômica ou outras soluções especiais. Após a lavagem do material de vidro com estas soluções, lava-se com água comum e após com água destilada. A solução sulfocrômica consiste numa solução de:

Um laboratório com nível 2 de segurança tem nível de contenção adequada para trabalho com agentes capazes de causar doenças em humanos ou animais, porém sem riscos graves para os profissionais e comunidade ambiente. Quais os acessórios obrigatórios que o técnico deve usar quando estiver manipulando os patógenos permitidos em laboratórios nível 2 de segurança?

As luvas devem ser usadas em atividades laboratoriais com riscos químicos, físicos (cortes, calor, radiações) e biológicos. Fornecem proteção contra dermatites, queimaduras químicas e térmicas, bem como as contaminações ocasionadas pelo exposição repetida a pequenas concentrações de numerosos compostos químicos. O que se pode fazer quando estamos usando luvas em procedimentos laboratoriais?